測(cè)定飼料中單寧的方案（分光光度法）

測(cè)定飼料中單寧的方案（分光光度法）

引言目前，“飼料禁抗”已成為全球畜牧業(yè)生產(chǎn)的趨勢(shì)，對(duì)提高畜產(chǎn)品質(zhì)量安全、增加綠色優(yōu)質(zhì)畜產(chǎn)品供給、降低養(yǎng)殖生產(chǎn)成本、促進(jìn)畜產(chǎn)品出口、實(shí)現(xiàn)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展意義深遠(yuǎn)。單寧作為替抗產(chǎn)品在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用具有一定的可行性。

關(guān)鍵詞  單寧  分光  美析

原理

用丙酮溶液提取飼料中單寧類化合物,經(jīng)過(guò)濾后,取濾液加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液和碳酸鈉溶液，顯色后,以試劑為空白對(duì)照,用分光光度計(jì)于760 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值,用單寧酸作標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定飼料中單寧含量。

儀器及試劑

美析UV-1500紫外可見(jiàn)分光光度計(jì):帶10 mm比色皿,可在760 nm處測(cè)定。

電子天平:感量為0. 1 mg.

粉碎機(jī)。

振蕩儀。

單標(biāo)線吸管:1 mL,10 mL,50 mL,A 級(jí)。刻度吸管:5 mL。

容量瓶:50 mL,100 mL,200 mL,A級(jí)。具塞三角瓶:250 mL。

中速定量濾紙。

除非另有說(shuō)明,本標(biāo)準(zhǔn)中所用試劑均為分析純,水符合GB/T 6682三級(jí)用水規(guī)定。

鎢酸鈉(Na₂O₄W·2H₂O).

磷鉬酸(H₂Mo₁₂O₄₀P·XH₂O)。

鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液:稱取100.0 g 鎢酸鈉、20.0 g磷鉬酸,溶于約750 mL水中，移入1000 mL回流瓶中,加入50 mL磷酸,充分混勻,接上冷凝管,在沸水浴上加熱回流2h,冷卻,轉(zhuǎn)入1000 mL容量瓶中,用水定容至刻度﹐搖勻,過(guò)濾﹐置棕色瓶中保存。室溫下可保存14 d。

無(wú)水碳酸鈉(Na₂CO₃)。

碳酸鈉溶液(75 g/L):稱取37.5 g無(wú)水碳酸鈉，溶于250 mL溫水中,混勻,冷卻,稀釋至500 mL,過(guò)濾到儲(chǔ)液瓶中備用。室溫下可保存7d.

丙酮(C₃H₆O)。

丙酮溶液(1＋1,體積比):分取等體積的水和丙酮(4.6),等體積混合,搖勻,即得。

單寧酸標(biāo)準(zhǔn)品(C₇₆ H₅₂O₄₆):含量≥95.0%。

單寧酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取單寧酸標(biāo)準(zhǔn)品適量(精確到0.0001g),加適量水溶解,用水定容至100 mL,搖勻,制成單寧酸質(zhì)量濃度約為1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。在冰箱中4℃可保存5d。

單寧酸標(biāo)準(zhǔn)使用液;精密量取單寧酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10.00 mL,置 200 mL容量瓶中,用水定容至200 mL,搖勻。此溶液?jiǎn)螌幩豳|(zhì)量濃度為50 mg/L,用時(shí)現(xiàn)配。

試樣制備

按GB/T 14699.1采樣,按GB/T 20195制備試樣,磨碎,通過(guò)0.45 mm孔篩,混勻,裝入密閉容器中,避光低溫保存?zhèn)溆谩?/span>

分析步驟

試液的制備

稱取試樣1 g~2 g(精確至0.000 1 g),置于250 mL具塞三角瓶中,精密加入丙酮溶液50.00 mL,加塞密封,置振蕩儀上振搖40 min,靜置,用中速定量濾紙過(guò)濾,棄去初濾液,續(xù)濾液供測(cè)定用。

測(cè)定

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取單寧酸標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00 mL,0.50 mL,1.00 mL,2.00 mL,3.00 mL,4.00 mL、5.00 mL和6.00 mL,分別置盛有約30 mL水的50 mL容量瓶中,搖勻;加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液2.5 mL,加碳酸鈉溶液5.0 mL,搖勻;分別用水定容至50 mL,播勻。單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度分別為0.00 mg/L,0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L,3.00 mg/L、4.00 mg/L,5.00 mg/L和6.00 mg/L,放置30 min顯色后,以標(biāo)準(zhǔn)曲線0.00 mg/L為空白,在760 nm波長(zhǎng)處測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,以單寧酸濃度為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

試樣的測(cè)定

精密量取試液1.00 mL,置盛有約30 mL水的50 mL容量瓶中,搖勻;加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液2.5 mL,加碳酸鈉溶液5.0 mL,搖勻;用水定容至50 mL,搖勻。放置30 min顯色后，以標(biāo)準(zhǔn)曲線0.00 mg/L為空白,在760 nm波長(zhǎng)處測(cè)定試樣溶液的吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出試液中單寧酸的濃度。如果吸光度值超過(guò)6.00 mg/L單寧酸的吸光度時(shí),將試液稀釋后重新測(cè)定。

計(jì)算和結(jié)果的表述

試樣中單寧(以單寧酸計(jì))的含量X,以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示,單位為毫克每千克(mg/kg),按式計(jì)算。

式中:

c——試樣測(cè)定液中單寧酸的濃度,單位為毫克每升(mg/L);

v——試樣定容體積,單位毫升(mL);

D——試樣稀釋倍數(shù);

m——試樣質(zhì)量,單位為克(g)。

儀器參數(shù)

關(guān)于我們

上海美析儀器公司簡(jiǎn)介

上海美析儀器有限公司(以下簡(jiǎn)稱美析)，是一家具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測(cè)試儀器領(lǐng)域，不斷開(kāi)發(fā)出先進(jìn)的產(chǎn)品，使美析成為優(yōu)質(zhì)儀器資源的供應(yīng)者。

      美析主營(yíng)光譜類儀器可見(jiàn)分光光度計(jì)、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計(jì)、原子熒光光度計(jì)、ICP電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，目前，我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、無(wú)機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。同時(shí)美析利用在產(chǎn)品機(jī)械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計(jì)、電氣應(yīng)用和軟件開(kāi)發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合市場(chǎng)的最新實(shí)際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。

美析的總部及生產(chǎn)基地設(shè)在上海，營(yíng)銷中心設(shè)在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國(guó)內(nèi)外的部分科研單位也進(jìn)行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。為更好的服務(wù)于廣大客戶，美析儀器國(guó)內(nèi)設(shè)有12家辦事機(jī)構(gòu)，度身定制符合您需求的應(yīng)用解決方案，提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務(wù)國(guó)內(nèi)用戶的同時(shí)，美析也與20多個(gè)國(guó)家的分銷機(jī)構(gòu)建立了深度的戰(zhàn)略合作關(guān)系。

（美析儀器不僅僅只是一家高新技術(shù)認(rèn)證企業(yè)，更通過(guò)了CE認(rèn)證、FCC認(rèn)證、RoHS認(rèn)證以及國(guó)內(nèi)多項(xiàng)資質(zhì)審查認(rèn)證，并有著多項(xiàng)自行研發(fā)的光譜類專利版權(quán)等等）