磺胺類藥物的血藥濃度測定及藥動學參數的應用方案（比色法）
磺胺類藥物的血藥濃度測定及藥動學參數的應用方案（比色法）
原理
磺胺類藥物及苯環(huán)上有游離氨基的化合物在酸性溶液中與亞硝酸鈉進行重氮化反應，生成重氮鹽，此外在堿性溶液中與酚類物質(如麝香草酚)發(fā)生偶聯反應，生成橙紅色偶氮化合物，可在560 nm波長下進行比色測定磺胺嘧啶的濃度。
儀器與材料
家兔
肝素 磺胺嘧啶鈉 三氯醋酸 亞硝酸鈉 鹽酸 戊巴比妥鈉 麝香草酚 肝素 生理鹽水
試管 離心管 注射器 吸管 離心機
步驟
麻醉并固定：
取健康家兔一只，稱重，3%戊巴比妥鈉1 ml /kg，耳緣靜脈麻醉，麻醉后，仰臥位固定在兔臺上。
手術：
縱向切開頸部正中皮膚，分離頸下組織，找到氣管，在氣管一側分離出頸總動脈，從頸總動脈下穿兩線待用。由耳緣靜脈注射肝素鈉1 ml /kg，結扎遠心端，近心端用動脈夾夾住，兩端之間留2 cm 距離，用眼科剪在遠心端朝近心端方向呈45 度角剪小口，然后從向心方向插入塑料管，推進1～2 cm結扎并固定，塑料管用止血鉗夾住，松開動脈夾。
取空白血：
取1 ml，置于干燥的含肝素的試管中，振搖。
給藥取血：
從耳緣靜脈注射20％磺胺嘧啶鈉溶液（1.0 ml/kg），給藥后2. 5. 10. 20和30 分鐘分別取血1 ml，置于干燥的含肝素的試管中，振搖。
去蛋白：從每份血樣中分別取血0.2 ml 置于離心管中，加入5％三氯醋酸4.6 ml充分振搖后放置數分鐘，然后放入離心機內離心，使血中蛋白質沉淀完全。
重氮化及偶合化：取上清液1.5 ml依次加入2N鹽酸0.25 ml和5％亞硝酸鈉0.3 ml，充分振搖后再加入麝香草酚0.3 ml振搖后呈橙紅色。
測定：
將上清液倒入比色皿中內，放入分光光度計內，以給藥前血樣作空白對照，于560 nm波長處進行比色測定，記錄其光密度值。
制作標準曲線
將給藥后將不同時間的光密度輸入計算器，計算出不同時間酚紅的血漿濃度。以濃度為橫坐標，以光密度為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程。以血漿藥物濃度的對數值為縱坐標，時間為橫坐標，其時量關系常呈直線，
該直線的方程式為logCt=lgCO-k/2.303·t
藥物血漿半衰期T1/2=0.693/k(單位：h或min)
采用直線回歸的運算程序，計算出不同時間酚紅的血漿濃度。
注意事項
1. 分離頸總動脈時，要把神經分離開，結扎的時候不能結扎神經。
2. 用取液器取上清液的時候，小心謹慎，不要取出血。
3. 離心時應將取血試管重量平衡后對稱置入。
4. 禁止用手接觸比色皿的透光面，若有液體，用擦鏡紙擦拭干凈。
儀器參數
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上海美析儀器公司簡介
上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析)，是一家具有自主知識產權的高新技術企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測試儀器領域，不斷開發(fā)出先進的產品，使美析成為優(yōu)質儀器資源的供應者。
美析主營光譜類儀器可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計、原子熒光光度計、ICP電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP電感耦合等離子體質譜儀，目前，我們的產品已廣泛應用于有機化學、無機化學、生物化學、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農業(yè)等領域。同時美析利用在產品機械結構、光學設計、電氣應用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經驗，結合市場的最新實際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。
美析的總部及生產基地設在上海，營銷中心設在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國內外的部分科研單位也進行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉化為生產力。為更好的服務于廣大客戶，美析儀器國內設有12家辦事機構，度身定制符合您需求的應用解決方案，提高產品的附加值。在不斷服務國內用戶同時，20多個國家的分銷機構建立了深度的戰(zhàn)略合作關系。
（美析儀器不僅僅只是一家高新技術認證企業(yè)，更通過了CE認證、FCC認證、RoHS認證以及國內多項資質審查認證，并有著多項自行研發(fā)的光譜類專利版權等等）
