測(cè)定蛋白核酸含量的應(yīng)用方案(超微量紫外吸收)
測(cè)定蛋白核酸含量的應(yīng)用方案(超微量紫外吸收)
實(shí)驗(yàn)原理
測(cè)蛋白質(zhì)含量的原理
由于蛋白質(zhì)分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵，因此蛋白質(zhì)有吸收紫外線的性質(zhì)，吸收高峰在280nm波長(zhǎng)處。在此波長(zhǎng)范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)溶液的光吸收值( A280)與其含量成正比關(guān)系，可用作定量測(cè)定。
測(cè)核酸含量的原理
核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收UV的性質(zhì)，其吸收高峰在260nm波長(zhǎng)處。DNA濃度( ug/ml) =A260/0.024/L*稀釋倍數(shù)(L為比色池厚度1cm)
儀器及試劑
標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。結(jié)晶牛血清蛋白，預(yù)先經(jīng)微量凱氏定氮法測(cè)定蛋白氮含量，根據(jù)其純度配制成1mg/ml蛋白溶液。
待測(cè)蛋白溶液
核酸溶液
操作步驟
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
按下表分別向每支試管加入各種試劑，搖勻。選用光程為1cm的石英比色杯，在280nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定各管溶液的0A280值。以A280值為縱坐標(biāo)，蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
樣品測(cè)定
取待測(cè)蛋白質(zhì)溶液1ml,加入蒸餾水3ml，搖勻，按上述方法在280nm波長(zhǎng)處測(cè)定光吸收值，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出待測(cè)蛋白質(zhì)的濃度。
取待測(cè)核酸溶液1ml， 加入蒸餾水3ml，測(cè)定核酸的濃度。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
測(cè)得的八個(gè)試管中溶液的A值如圖所示
蛋白質(zhì)樣品的A值為0.063
核酸樣品的A值為0.039
蛋白質(zhì)含量
根據(jù)方程當(dāng)A=0. 063時(shí)，0. 0630=0. 6123c+0. 0070.
C=0.0945mg/ml .
因?yàn)槿芤合♂屃?/span>4倍，所以樣品蛋白的濃度為
0.0945*4=0. 378mg/ml
核酸含量
DNA濃度= A260/0.024/L*稀釋倍數(shù)
=0.039/0.024/1*4
=7.8 ug/ml
儀器參數(shù)
UL-1000超微量紫外可見分光光度計(jì)產(chǎn)品參數(shù)
1．產(chǎn)品簡(jiǎn)介
超微量紫外可見分光光度計(jì)是一類很重要的分析儀器 ,無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門 ,超微量紫外可見分光光度計(jì)都有廣泛而重要的應(yīng)用。超微量紫外可見分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器，常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。超微量紫外可見分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。
2．儀器特點(diǎn)
*檢測(cè)所需樣微量，最低只需0.5ul
*檢測(cè)范圍寬，比傳統(tǒng)的分光光度計(jì)的上限高100倍
*對(duì)于多數(shù)樣品而言，無(wú)需稀釋
*機(jī)器無(wú)需預(yù)熱，直接測(cè)量，無(wú)需檢測(cè)容器，日常消耗低
*全波長(zhǎng)190-1100nm，分辨率1nm，儀器都自動(dòng)給出全波長(zhǎng)的掃描結(jié)果190-850nm
*體積小巧，便攜式包裝，滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的需求
*通過PC控制實(shí)現(xiàn)更精確和靈活的測(cè)量
3．技術(shù)指標(biāo)
*最小樣本量：0.5μl
*光程：1mm/0.2mm
*波長(zhǎng)范圍：190～850nm
*波長(zhǎng)精度：1 nm
*波長(zhǎng)分辨率：≤0.3nm（FWHM 在 Hg 253.7nm）
*吸光率精度：2%（0.76 在 257nm）
*吸光率分辨精度：0.002Abs（1mm 光程）
*吸光率范圍：0.02～300 (等效10mm光程)
*可準(zhǔn)確測(cè)量范圍：0.1～5 Abs. ±0.1Abs 5～80 Abs. ±2%
*偵測(cè)器：3648像素線性CCD陣列
*光源：微型氙氣閃光燈系統(tǒng)
*測(cè)量時(shí)間：<5 秒
*尺寸：200mm×130mm×136mm（L×W×H）
*重量：≤ 2.0kg
*樣本檢測(cè)平臺(tái)材質(zhì)：304 不銹鋼和石英
*輸入電壓：AC100～240V 50-60Hz
*操作電源功率：24W
關(guān)于我們
上海美析儀器公司簡(jiǎn)介
上海美析儀器有限公司(以下簡(jiǎn)稱美析)，是一家具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測(cè)試儀器領(lǐng)域，不斷開發(fā)出先進(jìn)的產(chǎn)品，使美析成為優(yōu)質(zhì)儀器資源的供應(yīng)者。
美析主營(yíng)光譜類儀器可見分光光度計(jì)、紫外可見分光光度計(jì)、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計(jì)、原子熒光光度計(jì)、ICP電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，目前，我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、無(wú)機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。同時(shí)美析利用在產(chǎn)品機(jī)械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計(jì)、電氣應(yīng)用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合市場(chǎng)的最新實(shí)際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。
美析的總部及生產(chǎn)基地設(shè)在上海，營(yíng)銷中心設(shè)在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國(guó)內(nèi)外的部分科研單位也進(jìn)行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。為更好的服務(wù)于廣大客戶，美析儀器國(guó)內(nèi)設(shè)有12家辦事機(jī)構(gòu)，度身定制符合您需求的應(yīng)用解決方案，提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務(wù)國(guó)內(nèi)用戶的同時(shí)，美析也與20多個(gè)國(guó)家的分銷機(jī)構(gòu)建立了深度的戰(zhàn)略合作關(guān)系。
（美析儀器不僅僅只是一家高新技術(shù)認(rèn)證企業(yè)，更通過了CE認(rèn)證、FCC認(rèn)證、RoHS認(rèn)證以及國(guó)內(nèi)多項(xiàng)資質(zhì)審查認(rèn)證，并有著多項(xiàng)自行研發(fā)的光譜類專利版權(quán)等等）
