總磷總氮聯(lián)合測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告

關(guān)鍵詞：總磷總氮；分光光度法；美析儀器www.macylab.com；UV-1300

1. 實(shí)驗(yàn)概述 1.1

實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙?/span>

通過實(shí)驗(yàn)，初步了解水體營(yíng)養(yǎng)元素（氮、磷）聯(lián)合測(cè)定的原理與方法，對(duì)湖

塘水質(zhì)監(jiān)測(cè)規(guī)范和要求有較直觀的認(rèn)識(shí)。同時(shí)，認(rèn)識(shí)到要在水質(zhì)監(jiān)測(cè)領(lǐng)域有創(chuàng)新，必須關(guān)注生物（生態(tài)）工程、化學(xué)工程等相關(guān)領(lǐng)域的理論和技術(shù)發(fā)展。

1.2實(shí)驗(yàn)原理

過硫酸鉀水溶液在60℃以上時(shí)發(fā)生如下反應(yīng)：

K2S2O8 + 2H2O = 2KHSO4 + O2 + 2H+

如果將K2S2O8和NaOH按一定的比例混合作為氧化劑，則消解反應(yīng)開始時(shí)溶液呈堿性。K2S2O8分解產(chǎn)生的氧（O2）將水樣中不同形態(tài)的氮氧化成硝酸鹽，同時(shí)K2S2O8分解產(chǎn)生的H+不斷中和NaOH。當(dāng)NaOH被H+完全中和后溶液逐漸變成中性甚至酸性。在弱酸性溶液中，K2S2O8分解產(chǎn)生的氧（O2），又將各種形態(tài)的磷氧化成正磷酸鹽。因此，該方法的關(guān)鍵是要選擇一個(gè)適度的K2S2O8溶液。

1.3實(shí)驗(yàn)條件

（1） 實(shí)驗(yàn)儀器

微波密封消解COD快速測(cè)定儀：精密pH計(jì)（pHS-3C）；紫外分光光度計(jì)（UV-1300）；立式壓力蒸氣滅菌器（LS-C50L）；50mL聚四氟乙烯密封消解罐，25mL、50mL比色管若干。 （2） 實(shí)驗(yàn)試劑

a） 無氨水：每升去離子水中加0.1mL硫酸在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄

去50ml初餾液，接取其余餾出液體于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

b） 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（C=100.00 mg/L）：硝酸鉀在105～110℃烘箱中干

燥3h，在干燥器中冷卻后，稱取0.7218g，溶于水中，移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線在0～10℃暗處保存，或加入1～2mL三氯甲烷保存，可穩(wěn)定6個(gè)月。

c） 堿性過硫酸鉀溶液：稱取40g過硫酸鉀，分別加入6g氫氧化鈉，溶

于水中，稀釋至1000mL，配制成6g/L NaOH的堿性過硫酸鉀溶液存放在聚乙烯瓶?jī)?nèi)。

d） 磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（C=50.00mg/L）：稱取0.2197±0.001g于110℃干燥

2h的磷酸二氫鉀（KH2PO4），用水溶解后轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加入大約800mL水，加5mL的（1+1）H2SO4，用水稀釋至標(biāo)線。

e） 鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。在不斷攪拌下，將鉬酸銨溶液徐徐加到300mL（1+1）H2SO4中，加酒石酸銻鉀溶液，并且混合均勻，此試劑貯存于棕色瓶中冷處保存，至少穩(wěn)定2個(gè)月。

抗壞血酸溶液，100g/L：溶解10g抗壞血酸于水中，并稀釋至100mL。該溶液貯存于棕色玻璃瓶中，在冷處可穩(wěn)定幾周。如不變色可長(zhǎng)時(shí)間使用。

含硝酸鹽氮10.00mg/L、磷5.00mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：準(zhǔn)確移取100.00mg/L的硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液10.00mL，含磷50.00mg/L的標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液10.00mL于100mL的容量瓶中，定容至100mL。

以上試劑均用無氨水或新鮮去離子水作為空白用水分別配置。

2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)步驟

（1） 水樣的消解

準(zhǔn)確移取混勻水樣10mL、堿性過硫酸鉀溶液5mL于消解罐中，旋緊外蓋，每次將6個(gè)消解罐均勻放在微波爐負(fù)載盤上圍成一圈進(jìn)行消解，消解12min + 10s（若加空白試驗(yàn)，則消解14min + 10s）。消解完后取出消解罐用水冷卻至室溫，用蒸餾水將內(nèi)蓋沖洗三次以上，要求沖洗干凈，沖洗液全部移至25mL比色管中，定容至25mL。

（2） 總氮總磷的

總氮的測(cè)定：取消解后溶液10mL置25mL比色管中，定容至標(biāo)線。移取部分溶液至10mm石英比色皿中，在紫外分光光度計(jì)上，以無氨水作參比，分別在波長(zhǎng)為220與275nm處測(cè)定吸光度，并用公式A=A220-A275求出校正習(xí)慣度A。

總磷的測(cè)定：取消解后溶液10mL置25mL比色管中，定容至標(biāo)線。室溫下放置15min后，使用光程為30nm比色皿，在700nm波長(zhǎng)下，以無氨水做參比，測(cè)定吸光度?？鄢瞻自囼?yàn)的吸光度后，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得總磷的含量。

（3） 空白試驗(yàn)

空白試驗(yàn)除以10mL無氨水代替試料外，采用與測(cè)定完全相同的試劑、用量和分析步驟進(jìn)行操作。

（4） 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取用無氨水配置的含硝酸鹽氮10.00mg/L、磷5.00mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（N：0.10mL、0.30mL、0.50mL、1.00mL、5.00mL、10.00mL；P：0.20mL、0.40mL、1.20mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL）依次于12個(gè)消解罐中，分別加無氨水或新鮮去離子水至10mL，加堿性過硫酸鉀溶液5mL，然后按照水樣消解方法消解12min，按照總氮總磷的測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，所得數(shù)據(jù)以濃度對(duì)吸光度作圖。

總氮的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制時(shí)，零濃度溶液和硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用溶液制得的校準(zhǔn)系列完成全部分析步驟，于波長(zhǎng)220和275nm處測(cè)定吸光度后，分別按公式：As=As220-2As275，Ab=Ab220-2Ab275，At=As-Ab求出除零濃度外其他校準(zhǔn)系列的校正吸光度As和零濃度的校正吸光度Ab及其差值At，按At值與相應(yīng)的NO3-N含量（μg）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)共享標(biāo)準(zhǔn)曲線：

說明：公式中出現(xiàn)的2E-05表示的意思是2*10。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果： TP測(cè)定結(jié)果:

樣品1：在y=0.004x+0.0009中，當(dāng)y=0.009時(shí)， 得出x=2.025mg;含量：C1=2.025/10mg/ml=0.2025ug/L

樣品2：在y=0.004x+0.0009中，當(dāng)y=0.0135時(shí)，得出x=3.150mg;含量：C1=3.150/10mg/ml=0.3150ug/L

樣品3：在y=0.004x+0.0009中，當(dāng)y=0.0085時(shí)，得出x=1.900mg;含量：