紫外分光光度法測定胡椒堿的含量
發(fā)布日期：2017-09-21 點(diǎn)擊次數(shù)：
關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；胡椒堿；美析儀器www.macylab.com；UV-1300PC
摘要：本文研究了胡椒堿的乙醇溶液在紫外光譜區(qū)有一個靈敏的吸收峰，其最大吸收波長為342mm，據(jù)此建立了一個簡單、快速、選擇性好的測定胡椒中胡椒堿含量的新的紫外分析法。本法胡椒堿濃度在0～70μg／ml范圍內(nèi)服從比耳定律。
目前，市售胡椒粉摻雜使假者較多，其測定方法多為定性方法 。關(guān)于胡椒中胡椒堿的定量分析曾經(jīng)有薄層紫外掃描法和比色法，前者受儀器條件的限制，一些基層單位尚難普及，后者較前者繁雜。本文介紹一種容易推廣的直接紫外光度法，該方法簡單、快速、準(zhǔn)確。
1 試劑與儀器
1．1 試劑無水乙醇、活性炭、胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。精密稱取胡椒堿0.1000g用無水乙醇溶解于容量瓶中，并定容為100ml；胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)使用溶液臨用時吸取儲備液10.0ml于100ml容量瓶中，以無水乙醇定容至刻度。
1．2 儀器V-1300型分光光度計
2 實(shí)驗(yàn)方法
2．1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
分別吸取0.00、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70ml胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)使用溶液于10.0ml比色管中，用無水乙醇稀釋至刻度，混勻。用1cm比色杯，以無水乙醇作參比，于波長342nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2．2 樣品中胡椒堿的提取與測定
準(zhǔn)確稱取經(jīng)粉碎并全部通過100目篩過篩的樣品約0.1g于50ml燒杯中，加人0.1g活性炭后加人少量無水乙醇，在電爐上小心熱至沸騰。分次過濾于100ml容量瓶中，以無水乙醇少量多次淋洗，定容至刻度，混勻。然后吸取5ml于10ml比色管中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。以下操作與標(biāo)準(zhǔn)曲線制備相同，進(jìn)行分光光度測定。
3 結(jié)果與討論
3．1 吸收光譜
實(shí)驗(yàn)表明：胡椒堿在無水乙醇介質(zhì)中的吸收光譜，其最大吸收波長λmax為342nm，本文選擇該波長下進(jìn)行測定。
3．2 活性炭用量的選擇
樣品的色澤對吸光度有一定影響，選用活性炭脫色，過濾后比色，效果較好。取五份胡椒堿含量一致的有色樣品，分別加入活性炭0．0、0.1、0.2、0.3、0.4g。實(shí)驗(yàn)表明：加入0.1g活性炭脫色效果好；少于0.1g脫色不完全；大于0.2g吸光度偏低。故本文試驗(yàn)選用活性炭用量為0.1g。
3．3 溶劑的選擇
分別用無水乙醇與1．2～～二氯乙烷作為溶劑，實(shí)驗(yàn)表明：兩種溶劑吸收光譜相近，無顯著性差異。由于1．2～ ～二氯乙烷對人體有一定的毒害作用，故選用無水乙醇作為溶劑。
3．4 乙醇濃度的選擇
乙醇濃度對吸光度影響較大，在提取胡椒中胡椒堿時，本文分別選用lO％、30％、50％、80％的無水乙醇作為溶劑，對同量樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)表明：lO％、30％提取液混濁，影響比色；50％、80％及無水乙醇的提取液呈透明狀態(tài)，但以無水乙醇提取液在342nm處吸收峰為最大，故本文選用無水乙醇作為溶劑。
3．5 標(biāo)準(zhǔn)曲線
實(shí)驗(yàn)表明：在0～70μg／ml范圍內(nèi)遵守比耳定律。以回歸分析法處理相關(guān)系數(shù)r=0.9998，最低檢出限為5μg／ml。
3．6 精密度
取2份樣品，在不同時間內(nèi)按操作方法進(jìn)行7次平行測定，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1～4.3％
3．7 方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)
樣品中加入不同量的胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)使用液按本法操作，回收率為94.2～96.9％ ，平均94.5％
3．8 干擾
在已知胡椒堿含量的三份溶液中，分別加入辣椒粉、桂皮粉、茴香粉各0.1g，按本法操作，測得結(jié)果比原來降低1.5～1.7％ ，說明基本無干擾。
關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；胡椒堿；美析儀器www.macylab.com；UV-1300PC
