紫外可見(jiàn)光度計(jì)

紫外分光光度法繪制苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線

發(fā)布日期：2017-09-04  點(diǎn)擊次數(shù)：
關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；美析儀器www.macylab.com；UV-1300;UV-1500
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?nbsp;
1、掌握紫外光譜法進(jìn)行物質(zhì)定性、定量分析的基本原理；
 2、學(xué)習(xí)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法。
 二、實(shí)驗(yàn)原理 
含有苯環(huán)和共軛雙鍵的有機(jī)化合物在紫外區(qū)有特征吸收。物質(zhì)結(jié)構(gòu)不同對(duì)紫外及可見(jiàn)光的吸收具有選擇性。其中，最大吸收波長(zhǎng)λ、摩爾吸收系數(shù)ε及吸收曲線的形狀不同是進(jìn)行物質(zhì)定性分析的依據(jù)。 
由于在λmax處吸光度A有最大值，在此波長(zhǎng)下A隨濃度的變化最為明顯，方法的靈敏度最大，故在紫外分光光度計(jì)上作苯酚水溶液（試液）的吸收光譜曲線，再由曲線上找出λmax，據(jù)此對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。 用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析時(shí)，若被分析物質(zhì)濃度太低或太高，可使透光率的讀數(shù)擴(kuò)展10倍或縮小10倍，有利于低濃度或高濃度的分析，其方法原理是依據(jù)朗伯-比耳定律：A=εbc。 
三、主要儀器與試劑 
主要儀器：美析紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)UV-1300;UV-1500；1cm石英吸收池2個(gè)；50mL比色管5支；5mL、1支；吸耳球1個(gè)。 試劑：苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：100mg/L；
 四、實(shí)驗(yàn)步驟 
 (1)、分析溶液的配制 
取5支50mL的比色管，用移液管分別準(zhǔn)確加入0.5mL、1mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL濃度為100mg/L的苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用去離子水稀釋至25mL刻度，搖勻。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄于標(biāo)準(zhǔn)表中。 
(2)、確定最大吸收波長(zhǎng) 
   取稀釋后濃度為8 mg/L的苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，在紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)上，用1cm石英吸收池，去離子水作參比溶液，在200~330nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，繪制苯酚的吸收曲線。在曲線上找出λmax1、λmax2。 
 (3)、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 
   各濃度的苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用1cm石英吸收池，去離子水作參比溶液，在選定的最大波長(zhǎng)下，按順序從低至高濃度依次測(cè)量各溶液的吸光度，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄于標(biāo)準(zhǔn)表中。以吸光度對(duì)濃度作圖，作出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。 
五、數(shù)據(jù)記錄及結(jié)果分析 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖  
 
關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；美析儀器www.macylab.com；UV-1300;UV-1500