紫外分光光度法測(cè)定藍(lán)莓中的維生素C含量
發(fā)布日期：2020-02-17 點(diǎn)擊次數(shù)：
紫外分光光度法測(cè)定藍(lán)莓中的維生素C含量 美析儀器www.macylab.com
一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 1掌握紫外分光光度計(jì)的工作原理及使用方法。
2掌握水果（或蔬菜）中的維生素C含量的測(cè)定方法。
二實(shí)驗(yàn)原理
紫外分光光度計(jì)快速測(cè)定法是根據(jù)維生素C具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿不穩(wěn)定的特性，于波長(zhǎng)243nm處測(cè)定樣品溶液與堿處理樣品兩者吸光度之差，通過(guò)查校準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算品中維生素C的含量。此法操作簡(jiǎn)單/快速準(zhǔn)確/重現(xiàn)性好結(jié)果令人滿意。特別合適含深色樣品的測(cè)定。
（三）儀器與試劑
儀器
分析天平，藍(lán)莓若干，研缽，容量瓶（10ml，50ml，100ml），濾紙，漏斗，5ml移液器
試劑
抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：用分析天平準(zhǔn)確稱取抗壞血酸10mg，加2ml 1%鹽酸，加蒸餾水定容至100ml，混勻。此抗壞血算溶液的濃度為100μg.ml-1
（四）實(shí)驗(yàn)步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
試管標(biāo)號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8
標(biāo)準(zhǔn)VC加入體積/ml 0.1 0.2 0.3 0.4 0 .5 0.6 0.8 1.0
蒸餾水 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.2 9.0
VC溶液濃度/（μg/ml） 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0
2樣品的測(cè)定
1． 樣品的提取：將果蔬菜品洗凈/擦干/切碎/混勻。稱取5.00g于研體中，加入2-5ml1%HCL,勻漿，轉(zhuǎn)移到25ml容量瓶中，稀釋至刻度。若提取液澄清透明，則可直接取樣測(cè)定，若有渾濁現(xiàn)象，可通過(guò)離心（10000g，10min）來(lái)消除。
2． 樣品的測(cè)定：取0.1-0.2ml提取液，放入盛有0.2-0.4ml10%鹽酸的10ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度后搖勻。以蒸餾水為空白，在243nm處測(cè)定其消光值。通過(guò)查標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品的維生素的含量。
（五）計(jì)算與數(shù)據(jù)
μＸV總
維生素C的含量（μg/g）=
V1ＸW總
式中：μ——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的抗壞血酸的含量
（μg）
V1——測(cè)消光值時(shí)吸取樣品溶液的體積（ml）
V總——樣品定容體積（ml）
W總——稱樣重量（g）
數(shù)據(jù)見(jiàn)excel表
（六）思考與討論
除了本實(shí)驗(yàn)中的方法外，抗壞血酸還有哪些測(cè)定方法？
答：一 氧化還原法
1， 直接碘量法
2， 6-二氯酚靛酚滴法
二/分光光度法
1. 紫外快速測(cè)定法
2. 2，4-二硝基苯肼法
3. 高鐵還原法測(cè)定血漿中的抗壞血酸
三，光電比濁法
四，電化學(xué)法
五，熒光分析法
1. 抗壞鐵酸的微量熒光測(cè)定法
2. 抗壞鐵酸總量的熒光測(cè)定法
一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 1掌握紫外分光光度計(jì)的工作原理及使用方法。
2掌握水果（或蔬菜）中的維生素C含量的測(cè)定方法。
二實(shí)驗(yàn)原理
紫外分光光度計(jì)快速測(cè)定法是根據(jù)維生素C具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿不穩(wěn)定的特性，于波長(zhǎng)243nm處測(cè)定樣品溶液與堿處理樣品兩者吸光度之差，通過(guò)查校準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算品中維生素C的含量。此法操作簡(jiǎn)單/快速準(zhǔn)確/重現(xiàn)性好結(jié)果令人滿意。特別合適含深色樣品的測(cè)定。
（三）儀器與試劑
儀器
分析天平，藍(lán)莓若干，研缽，容量瓶（10ml，50ml，100ml），濾紙，漏斗，5ml移液器
試劑
抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：用分析天平準(zhǔn)確稱取抗壞血酸10mg，加2ml 1%鹽酸，加蒸餾水定容至100ml，混勻。此抗壞血算溶液的濃度為100μg.ml-1
（四）實(shí)驗(yàn)步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
試管標(biāo)號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8
標(biāo)準(zhǔn)VC加入體積/ml 0.1 0.2 0.3 0.4 0 .5 0.6 0.8 1.0
蒸餾水 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.2 9.0
VC溶液濃度/（μg/ml） 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0
2樣品的測(cè)定
1． 樣品的提取：將果蔬菜品洗凈/擦干/切碎/混勻。稱取5.00g于研體中，加入2-5ml1%HCL,勻漿，轉(zhuǎn)移到25ml容量瓶中，稀釋至刻度。若提取液澄清透明，則可直接取樣測(cè)定，若有渾濁現(xiàn)象，可通過(guò)離心（10000g，10min）來(lái)消除。
2． 樣品的測(cè)定：取0.1-0.2ml提取液，放入盛有0.2-0.4ml10%鹽酸的10ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度后搖勻。以蒸餾水為空白，在243nm處測(cè)定其消光值。通過(guò)查標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品的維生素的含量。
（五）計(jì)算與數(shù)據(jù)
μＸV總
維生素C的含量（μg/g）=
V1ＸW總
式中：μ——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的抗壞血酸的含量
（μg）
V1——測(cè)消光值時(shí)吸取樣品溶液的體積（ml）
V總——樣品定容體積（ml）
W總——稱樣重量（g）
數(shù)據(jù)見(jiàn)excel表
（六）思考與討論
除了本實(shí)驗(yàn)中的方法外，抗壞血酸還有哪些測(cè)定方法？
答：一 氧化還原法
1， 直接碘量法
2， 6-二氯酚靛酚滴法
二/分光光度法
1. 紫外快速測(cè)定法
2. 2，4-二硝基苯肼法
3. 高鐵還原法測(cè)定血漿中的抗壞血酸
三，光電比濁法
四，電化學(xué)法
五，熒光分析法
1. 抗壞鐵酸的微量熒光測(cè)定法
2. 抗壞鐵酸總量的熒光測(cè)定法
