紫外分光光度法對黃芩總黃酮的提取工藝研究

關(guān)鍵詞：黃芩；黃酮；提??；紫外分光光度法；美析儀器；UV-1500PC；

 

      摘要：黃酮類化合物泛指兩個具有酚羥基的苯環(huán)（A-與B-環(huán)）通過中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物，其基本母核為2-苯基色原酮。黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中常連接有酚羥基、甲氧基、甲基、異戊烯基等官能團(tuán)。此外，它還常與糖結(jié)合成苷。

 

      目的：探討黃芩中總黃酮提取工藝中的提取溶劑用量、提取時間、提取次數(shù)對黃芩中總黃酮得率的影響。

      方法：采用紫外分光光度法，測定不同提取溶劑用量、不同提取時間、不同提取次數(shù)所得到總黃酮含量。

      結(jié)果：通過正交實(shí)驗(yàn)，找到黃芩中總黃酮提取的最佳提取工藝。

      條件：30%乙醇提取3次，劑量：12，10，10倍，時間：2，1，1h。

      結(jié)論：該研究可以為工廠化黃芩總黃酮的生產(chǎn)過程制定合理的提取工藝提供理論依據(jù)，對生產(chǎn)具有一定的指導(dǎo)意義。

 

 

 

      黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi為常用中藥之一，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效。其主要有效成分為黃酮類化合物?，F(xiàn)代藥理研究證明黃芩不僅具有明顯的抗菌消炎、抗過敏、抗氧化、抗癌和抗病毒等作用，而且對心血管疾病也具一定的作用。從黃芩中提取黃芩苷的工藝研究報道大多以水為溶劑進(jìn)行煎煮提取，但此法黃芩苷的收率低，生產(chǎn)周期長。本研究采用正交實(shí)驗(yàn)，總黃酮為指標(biāo)，對各影響因素進(jìn)行研究，得到較佳的提取工藝，較大地提高了收率。

 

1材料與儀器

      1.1材料藥材：黃芩；試劑：黃芩苷標(biāo)品；甲醇；甲醇；磷酸。

      1.2儀器：UV-1500PC紫外分光光度計(jì)（美析（中國）儀器有限公司）。

 

2方法與結(jié)果

      2.1黃芩總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作精密稱定3mg的干燥至恒重的黃芩苷標(biāo)品，用甲醇定容于100ml容量瓶中，搖勻，作為對照品溶液，備用。用對照品溶液以甲醇為空白對照，進(jìn)行190～500nm的紫外掃描。掃描結(jié)果顯示在波長277.6nm處有最大吸收值，所以選擇277.6nm做為檢測波長。觀察對照品溶液于1h內(nèi)的穩(wěn)定性時，變化很小，因此采用不加顯色劑方法直接測定黃芩總黃酮。精密吸取對照品溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml，分置10ml容量瓶中，用甲醇定容到刻度，搖勻，以0.00ml對照品溶液作空白，于277.6nm處測定吸光度（A）。以A對濃度（C）進(jìn)行線性回歸，其方程為Y=66.878X-0.003（R2=0.9996，r=0.9998）。

 

      2.2正交設(shè)計(jì)優(yōu)化黃芩中總黃酮的提取工藝用L9（34）正交表來選擇黃芩的最佳提取工藝。稱取藥材9份，每份50g。用30%乙醇提取，以總黃酮含量為指標(biāo)，考察影響提取效果的3個因素：溶劑用量、最佳提取時間、提取次數(shù)。每份藥材提取后過濾，合并濾液，定容于277.6nm處測定吸光度（A），測定提取物中總黃酮的含量。

 

      3結(jié)果分析從正交分析結(jié)果及方差分析表來看，各因素對黃芩中總黃酮含量的影響程度為C>A>B，且C為極顯著性差異因素，A、B為顯著性差異因素，C3>C2>C1，A1>A2>A3，B3>B2>B1，最佳提取條件為A1B3C3，即溶劑用量（12，10，10），提取時間（2，1，1）h，提取3次為最佳提取工藝條件。

 

      4討論分光光度法測定黃酮含量的常用方法有直接測定法、Al（NO3）3法和AlCl3法，為了選擇合適的測定方法，我們用對照品溶液以甲醇為空白對照，進(jìn)行190～500nm的紫外掃描。掃描結(jié)果顯示在波長277.6nm處有最大吸收值，峰形好，所以選擇277.6nm做為檢測波長。進(jìn)一步觀察對照品溶液于1h內(nèi)的穩(wěn)定性時，變化很小，因此采用不加顯色劑方法直接測定黃芩總黃酮。

 

        根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果本實(shí)驗(yàn)優(yōu)選的最佳工藝為：提取溶劑為30%乙醇，提取3次，分別加12，10，10倍量溶劑，提取時間2，1，1h。為了驗(yàn)證這一結(jié)果，取3份藥材，每份50g，按照所選的提取工藝：提取溶劑為30%乙醇，提取3次，分別加12，10，10倍量溶劑，提取時間2，1，1h。最后得到總黃酮含量分別為19.03%，18.65%，19.48%。通過驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，總黃酮的提取效率都得到了比較好的結(jié)果。說明所選的工藝是穩(wěn)定而有效的，適合繼續(xù)放大生產(chǎn)。